构树是桑科多年生叶树种，又名谷浆树等。构树适应性广，生长速度快，耐瘠薄，耐盐碱，维护成本低。它具有很高的观赏价值，可以单独种植，成排(行道树)或成组种植。它是优良的造林树种。利用现代生物技术，对构树进行组织培养和快速繁殖。对构树茎段进行离体培养和繁殖，筛选出构树茎段不定芽诱导、不定芽增殖和壮苗生根的培养基，为实现快速无性繁殖、扩大种源生产和保存优良品种提供了有效的方法。

创盈购彩welcome 　　1材料和方法

　　1.1测试材料

　　在优良的母树上选择完整和健壮的枝条作为试验材料。

　　1.2试验方法

创盈购彩welcome 　　1.2.1外植体的消毒。用蘸有洗衣粉的细刷子刷收集的树枝，并用自来水冲洗30分钟以上。用75%酒精在洁净的工作台上浸泡15-30秒，用无菌水冲洗一次，用0.15%氯化汞溶液消毒6-8分钟，用无菌水冲洗3-4次;滤纸吸干后，将1-1.5厘米带芽茎段切下，接种在芽诱导培养基上。

创盈购彩welcome 　　1.2.2芽诱导培养。以MS为基本培养基，添加不同浓度的6-BA(0.1、0.5、1.0、2.0毫克/升)、NAA(0.1、0.2、0.5、1.0毫克/升)，通过正交试验设计16个处理。每种处理重复3次，重复9种植物。30天后，调查芽分化率(外植体数量/分化不定芽的外植体总数)、分化系数(不定芽总数/从外植体分化的外植体总数)和不定芽生长状况。

创盈购彩welcome 　　1.2.3芽增殖培养。以质谱为基础培养基，加入不同浓度的6-BA(0.1、0.5、1.0、2.0毫克/升)和NAA(0.1、0.2、0.5毫克/升)。通过正交试验设计了12个处理。每次处理重复3次，每次9株。30天后，研究芽的增殖因子和不定芽的生长状态。

　　1.2.4壮苗的生根培养。以1/2MS为基本培养基，添加不同浓度的NAA(0.1、0.2、0.5、1.0毫克/升)，共进行4个处理，每个处理重复3次，每次9株。40天后，观察生根率(生根苗数/生根苗总数)、平均生根数(总生根数/生根苗数)、根状态和不定芽生长状态。

　　1.2.5培养条件。在MS培养基中加入2%蔗糖和0.6%琼脂，5.8 ~ 6.0，培养温度252，光照强度2000 ~ 3000勒克斯，光照时间12小时/天

创盈购彩welcome 　　2结果和分析

创盈购彩welcome 　　2.1芽诱导培养

　　接种后2周茎段底部形成茎段愈伤组织，3周后观察到不定芽形成。当MS6-BA1毫克/升NAA 0.1毫克/升时，不定芽诱导率高，芽生长势好，切口愈伤组织适宜。然而，添加其他激素的诱导率较低或较高，但不定芽生长较弱。认为MS6-BA1毫克/升NAA 0.1毫克/升是诱导不定芽的培养基。

　　2.2 芽增殖培养

　　芽诱导培养后形成的生长健壮的含有多个芽的芽丛切割成单芽，并将芽丛中2cm 以上的单芽切割成含有一个腋芽的茎段接种在芽增殖培养基上，不定芽接种后2 周左右可观察芽的增殖情况。6-BA 浓度越高，芽的增殖倍数越大，但新芽生长细弱叶色淡绿，综合考虑认为MS+6-BA 0.5 mg/L +NAA0.1 mg/L 为不定芽增殖的培养基。

创盈购彩welcome 　　2.3 壮苗生根培养

创盈购彩welcome 　　当不定芽长到2～3cm 高时转移到壮苗生根培养基上。2 周后有不定根产生，40 天时观察认为4 种不同浓度的生根培养基对诱导均有明显的效果，其中1/2MS+NAA 0.1mg/L 培养基生根率较高，不定芽生长较好

创盈购彩welcome 　　2.4组培苗的移植

　　当瓶苗长到4-6片叶和3-5厘米株高时，即可炼苗移栽。取出瓶苗，用清水清洗根培养基，种植在珍珠岩、蛭石和泥炭土混合的111基质中，用塑料薄膜覆盖，增加空气湿度，提高成活率，幼苗成活后每2周用稀释的培养基母液对叶表面进行施肥，使幼苗健康生长。

　　3展望

　　以构树的带芽茎段为外植体进行不定芽的组织培养，通过调节培养基中的激素配比，大大加快了不定芽的分化速度，繁殖系数达到5-10倍，可以在短时间内提供大量的种苗，解决了根蘖，构树常规播种繁殖速度慢的现状改变了扦插等方法，不仅解决了构树苗木需求量大的问题，为造纸、饲料等相关行业提供了充足的苗木来源，也为转基因品种的保存、遗传转化和培育筛选奠定了坚实的理论基础。

相关文章：